ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標記在抗體/抗原分子上,形成酶標抗體/酶標抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后,作用于底物使之呈色,根據(jù)顏色的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。
ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種,其特點是利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應(yīng)和酶促反應(yīng)都在其中進行。在每次反應(yīng)后都要反復(fù)洗滌,這既保證了反應(yīng)的定量關(guān)系,也避免了末反應(yīng)的游離抗體/抗原的分離步驟。在ELISA法中。酶促反應(yīng)只進行一次,而抗原、抗體的免疫反應(yīng)可進行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反應(yīng)。
Elisa試劑盒技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點,并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發(fā)展成為許多新方法。此外,發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因為:用于Elisa技術(shù)的酶其種類遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。
生物界的酶多種多樣,有希望開發(fā)很多類型的酶用于試劑盒,并建立相應(yīng)的Elisa方法。相反,自然界的化學(xué)元素是有限的,放射性同位素的種類更加有限。第二,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對應(yīng)的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?br />
ELISA試劑盒比色結(jié)果:比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標準96孔的座架中,才可進行比色。